草菇耐低溫菌株的誘變選育與鑒定
SELECTION FOR COLD-RESISTENT STRAIN BY COMPLEX MUTAGENESIS OF VOLVARIELLA VOLVACEA AND IDENTIFICATION OF THE STRAIN
韓業(yè)君 曹暉 陳明杰 潘迎捷
摘 要：在草菇V23原生質體形成和再生的最佳條件下制備原生質體.分別用紫外線(UV),60Co-γ射線,硫酸二乙酯(DES)對原生質體進行復合誘變.初篩、復篩獲得耐常規(guī)低溫(4℃)10d的菌株VH.栽培實驗證明:VH在26℃下的生物學效率明顯優(yōu)于V23(CK),且差異極顯著.同工酶分析表明:VH過氧化物同工酶,酯酶同工酶譜帶數(shù)量及酶活性均發(fā)生變化;RAPD實驗顯示:VH相對于V23的變異系數(shù)為0.213.VH菇體正常,味道鮮美,食用后無毒副作用.氨基酸組成分析表明:除總氨基酸和谷氨酸含量VH高于V23外,其它氨基酸差異不明顯.VH遺傳性狀穩(wěn)定,是具有潛在應用價值的優(yōu)良菌株.
關鍵詞：原生質體,同工酶分析,氨基酸
分類號：Q939.96 文獻標識碼：A
文章編號：1672-6472(2004)03-0417-0422
基金項目：上海市農委科技興農重點項目資助(農科攻字(98)第01-14號)
作者簡介：陳明杰,通訊作者:mjchen@mail.china.com
作者單位：韓業(yè)君（南京農業(yè)大學生命科學學院微生物系,南京,210095;農業(yè)部食用菌遺傳育種重點開放實驗室,上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室;上海市農業(yè)科學院食用菌研究所,上海,201106）
曹暉（農業(yè)部食用菌遺傳育種重點開放實驗室,上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室;上海市農業(yè)科學院食用菌研究所,上海,201106）
陳明杰（農業(yè)部食用菌遺傳育種重點開放實驗室,上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室;上海市農業(yè)科學院食用菌研究所,上海,201106）
潘迎捷（農業(yè)部食用菌遺傳育種重點開放實驗室,上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室;上海市農業(yè)科學院食用菌研究所,上海,201106）
參考文獻：
［1］Chang ST, Hayes WA, 1978. The biology and cultivation of edible mushroom. New York:Academia Press, 573～605
［2］Chang ST, Buswell JA, Chiu SW, 1993. Mushroom biology and mushroom products. Hong Kong: The Chinese University Press,71 ～83
［3］Chang ST, Yau CK, 1971. Volvariella volvocea and its life history. American. Journal of Botany, 58:552～561
［4］Sanchez S, Demain A L, 1977. Enrich of autrophic mutants in Hansenulapolymorpha.European JAppl Microbiol, 4:45～49
［5］Guo LQ, Chen SC, 2001. Research advances in genetic transformation of edible fungi. Acta Edulis Fungi , 23 (7): 97～100 (in Chinese)
［6］Anon. (edited by Institute of Edible Fungi, Shanghai Academy of Agricultural Sciences), 1981. The Handbook of Edible Fungi Cultivation. Shanghai: Edulis Fungi Press. 1～462 (in Chinese)
［7］Wang MY, Chen M J, 2002. Isolation and purification of cold shock protein in Volvariella volvocea. Journal of Agriculture Biotechnology, 10 (2): 194～196 (in Chinese)
［8］Niu MY, Zhao ML, 1992. Experimental Technology of Cellular Biology. Beijing: Beijing Normal Univercity Press. 141～145 (in Chinese)
［9］Ge D, 2002. Isolation and identification of cold shock gene in Volvariella volvocea. Dissertation for MS degree, Liaoning Normal Univercity. 1～66 (in Chinese)
［10］Pan YJ, Ma AM, 1995. Study on homokaryotic protoplast breeding technique in Agaricus bisporus. Acta Edulis Fungi, 2 (4):11～17 (in Chinese)
［11］Hu NS, 1985. Isoenzyme Technology and Application. Changsha :Hunan Science and Technology Press. 1～365 (in Chinese)
［12］Bai LY, Ma YZ, 1996. The effects of low-dose 60Co- γ rays irradiation on some enzyme activities and isoenzyme zymogram in par-chio seedlings. Acta Agriculturae Nucleatae Sinica, 10 (1): 21～24 (in Chinese)
［13］上海農業(yè)科學院食用菌所,1981食用菌栽培手冊.上海:<食用菌>編輯部出版1～462
［14］郭麗瓊林俊芳,2001.THP基因的重新克隆及草菇表達載體的構建.食用菌學報,23(7):97～100
［15］王美艷,陳明杰,2002.草菇低溫誘導蛋白的分離與純化.農業(yè)生物技術,10(2):194-196
［16］牛敏英,趙孟蓮,1992.細胞生物學實驗方法與技術.北京:北京北京市師范大學出版社.1～328
［17］葛丹,2002.草菇低溫誘導基因的分離與鑒定.遼寧師范大學碩士學位論文.1～66
［18］潘迎捷,馬愛民,1995.雙孢蘑菇同核原生質體育種技術研究.食用菌學報,2(3):1～5
［19］胡能書,1985.同工酶技術及其應用.長沙:湖南科學技術出版社.1～365
［20］白玲玉,馬玉珠,1996.低劑量60Co-γ射線輻照對白菜苗期酶活性及同工酶的影響.核農學報,10(1):21～24
菌物學報
MYCOSYSTEMA
2004 Vol.23 No.3 P.417-422
